本文為您詳細介紹以下知識.有機化合物的
化學發(fā)光試劑,有機化合物的同系物結(jié)構(gòu)和性質(zhì)相似,使單一組分的測定碰到困難,因此有機化合物同系物的分析常與 HPLC 相結(jié)合。有機酸的化學發(fā)光分析 ( 見表 3) ,一般是先將其衍天生熒光物質(zhì)經(jīng)色譜分離后進行化學發(fā)光檢測。但衍生法有如下的缺點 : (1) 衍生反應不* ; (2) 衍生物穩(wěn)定性差,要求及時檢測 ; (3) 限制了分離方法和條件的選擇。由于衍生產(chǎn)物的性質(zhì)與待測物不同,導致分離效率和分辨率下降,同時增加分析的時間和勞動強度。在臨床醫(yī)學上,草酸是一個重要的檢測項目,可以直接用氧化化學發(fā)光反應測定尿液和草酸二乙酯中的草酸鹽及游離的草酸。另外還可以測定苯酮尿癥病人的尿液的苯丙酮酸的含量,方法是先在堿性條件下將苯丙酮酸氧化成 1 , 22 二氧雜環(huán)丁烷類化合物,然后裂解產(chǎn)生化學發(fā)光。另外可以將 Fe ( III )草酸配合物光解得到 Fe (II ) ,催化魯米諾-過氧化氫化學發(fā)光反應,此法線性范圍為 0 . 1 ~ 100uM 。此外酶聯(lián)偶合反應也可以用于某些有機酸的化學發(fā)光分析。
有機堿化學發(fā)光試劑,胺類化合物*離子化電勢呈如下規(guī)律 : 伯胺 > 仲胺 > 叔胺,并隨碳鏈增長,離子化電勢逐漸下降,因此叔胺化合物的檢測限較低,達 0 . 28 pM 。胺類化合物的分析 ( 見表 4) ,較多的是經(jīng)柱前衍生天生熒光衍生物,分離后用過氧草酸鹽化學發(fā)光體系檢測,也可將其天生希夫堿或其它產(chǎn)物氧化而發(fā)光。有些堿如腎上腺素等可直接氧化而發(fā)光。通常有一個經(jīng)驗規(guī)則,假如一物質(zhì)具有熒光或其反應產(chǎn)物有熒光,該物質(zhì)一般可發(fā)生化學發(fā)光反應,但也有例外。嘌呤堿是核酸的基礎(chǔ)物質(zhì),因此對嘌呤堿的分析測定將推動 DNA 分析方法的發(fā)展。在酸性醇液中腺嘌呤與苯甲醛反應,然后用過氧化氫氧化反應產(chǎn)生化學發(fā)光,此法具有很好的選擇性,線性范圍為 1 . 5×10 - 7 ~ 5 . 0×10 - 7 M ,用此法測定鳥嘌呤靈敏度比熒光法高 20 倍。
氨基酸化學發(fā)光試劑,氨基酸分析方法的改進有利于推動生物技術(shù)、基因工程、 DNA 重組和基因克隆等的發(fā)展。由于盡大多數(shù)氨基酸沒有內(nèi)源熒光特性,因此用過氧草酸鹽體系測定氨基酸需將其衍天生熒光物質(zhì),但此法避免不了衍生法所固有的缺點。此外亦可通過測定氨基酸與氨基酸氧化酶反應產(chǎn)生的過氧化氫來測定氨基酸的含量,如 L 2 氨基酸經(jīng)反相色譜柱分離后流經(jīng) L 2 氨基酸氧化酶反應器產(chǎn)生過氧化氫,然后用過氧草酸鹽體系檢測。氨基酸與 Ru (b ipy) 3+3 反應,用活動注射化學發(fā)光法檢測,相對于脯氨酸和天冬酰胺檢測限可分別達到 20 pmo l 和 50 pmo l 。一般來說,仲胺反應產(chǎn)生的的發(fā)光強度比伯胺大。對氨基酸上取代基性質(zhì)研究表明,給電子基有利于增強化學發(fā)光強度。更多相關(guān)產(chǎn)品,請咨詢本.